Mise au point de la transformation génétique du pélargonium par agrobacterium : applications pour l'amélioration variétale
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Les principaux objectifs de l'obtenteur de pélargonium est la création de plantes montrant de nouveaux coloris floraux et un port compact. Un programme de transformation génétique du pélargonium par agrobacterium tumefaciens a été initié afin d'atteindre ces objectifs. La souche bactérienne EHA 101 a été utilisée avec des plasmides comportant le gène de la -glucuronidase et un gène conférant la résistance à l'hygromycine pour la mise au point des conditions de transformation. Des plantes transformées ont été obtenues à partir de cotylédons et d'hypocotyles pour p. X hortorum et de pétioles pour le p. X hederaefolium. Cette première partie du travail a montré que l'organisation du t-DNA est un élément essentiel. Afin d'éviter des intégrations incomplètes du t-DNA, le gène de sélection doit être situé vers la bordure gauche et le t-DNA doit être le plus court possible. Dans un second temps, les essais de transformation ont été conduits avec des plasmides comportant des gènes d'intérêt horticole : des gènes chimériques anti-chalcone synthétase (CHS) et anti-dihydroflavonol-4-reductase (DFR) pour modifier la pigmentation florale ainsi que les gènes ROL susceptibles de modifier la morphogénèse de la plante. A ce jour, des cals transformés avec le cadre de lecture ouvert (ORF) 12 contrôlé par les séquences régulatrices du CAMV ont été obtenus. Enfin, des plantes transformées après inoculation avec les constructions anti-CHS du pélargonium et anti-DFR de l'antirrhinum majus, sous contrôle du promoteur et terminateur du CAMV ont été obtenues. L'analyse moléculaire réalisée à partir du premier clone obtenu montre l'insertion du gène anti-CHS dans le p. X hederaefolium. Seule, l'observation des plantes en fleurs confirmera de l'intérêt de cette stratégie anti-sens pour la modification de la pigmentation florale chez le pélargonium.