Construction de banques d'ADNc de palmier dattier (Phoenix dactylifera L. ). Différenciation de cultivars par RFLP à l'aide des ADNc : isolement et caractérisation d'un ADNc polymorphe. Isolement et caractérisation d'un ADNc codant pour la glutamine synthetase cytosolique
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La caractérisation des cultivars de palmier dattier a été réalisée par des analyses RFLP et RAPD à partir des feuilles internes des rejets. Des sondes ont été isolées d'une banque d’ADNc construite à partir d'ARNM extraits de cals organogènes du cultivar bou sthammi noire. La sonde ADNc 1 a permis d'obtenir neuf profils d'hybridation distincts pour chacun des neuf cultivars étudiés. Des profils d'amplification distincts pour trois cultivars ont été obtenus par RAPD avec des amorces oligonucléotidiques. Des analyses RFLP ont été aussi réalisées sur du matériel maintenu in vitro ou issu de culture tissulaire afin de déterminer si d'éventuelles variations induites par la culture in vitro affectaient le génome du palmier dattier. L'analyse moléculaire de la sonde ADNc 1 a été abordée. Le transcrit qui comprend 2400 nucléotides est exprimé dans les feuilles et les cals organogènes. Sa séquence partielle a été établie, l'absence d'homologie entre cette séquence de 1456 nucléotides et les séquences enregistrées dans les banques de données suggère que nous avons isole un ADNc codant pour une nouvelle protéine. Un ADNc codant pour la glutamine synthétase a été isolé. L'absence au niveau de la séquence des aminoacides de cet ADNc de l'extension c-terminale qui caractérise la structure primaire des séquences des sous-unités chloroplastiques montre que l’ADNc isole code pour la sous-unité cytosolique de la glutamine synthétase.