Abstract FR:

L'etude porte sur le metabolisme du glucose d'une souche de levure: hanseniaspora uvarum k#5. L'activite metabolique, les activites enzymatiques de la glycolyse et du metabolisme du pyruvate ont ete analysees en fonction de differents parametres (composition du milieu, taux de dilution et pression partielle en oxygene dissous). La souche presente un metabolisme strictement oxydatif en presence d'un milieu optimise et pour des valeurs de taux de dilution inferieures a 0,24 h#-#1. Le metabolisme est oxydo-fermentaire, avec production de metabolites secondaires (les principaux etant glycerol, acetate et acetate d'ethyle), lorsque le milieu est carence en un element, pour une valeur de taux de dilution superieure a 0,24 h#-#1, ou en culture batch. Le metabolisme est fermentaire, avec production d'ethanol, uniquement lorsque la pression partielle en oxygene dissous est proche de 0. Dans ce cas, le niveau d'activite des enzymes de la fermentation alcoolique est fortement augmente. Une alcool deshydrogenase d'h. Uvarum k#5 (huadhii) a ete purifiee et caracterisee. Il s'agit d'une metallo-enzyme a structure trimerique (mm = 120 000 g. Mol#-#1) presentant des groupements thiols necessaires a son activite. Les etudes cinetiques ont montre que cette enzyme fonctionne selon un mecanisme sequentiel aleatoire, avec interaction entre les sites de fixation des substrats. Les valeurs des constantes cinetiques sont en faveur de la reduction de l'acetaldehyde en ethanol. Les etudes de specificite vis-a-vis des substrats ont confirme ce point de vue dans la mesure ou les aldehydes sont substrats preferentiels. L'ensemble de ces resultats, complete par l'analyse de la sequence n-terminale des 20 premiers acides amines de huadhii a permis d'apparenter cette enzyme avec les alcools deshydrogenases microbiennes du groupe i