Abstract FR:

Dans le but d'etudier la regulation de la fixation de l'azote atmospherique au niveau des cellules infectees de la zone centrale des nodosites de soja (glycine max l. ), nous avons cherche a obtenir des protoplastes de cellules infectees (pci) capables de conserver leur activite nitrogenase in vitro. Nous avons optimise la viabilite des pci en effectuant les macerations avec un melange enzymatique compose de 1,5% de cellulase rs et 1% de pectolyase y23, et en ajustant la tonicite des milieux avec 5,5% de mannitol et 5% d'inositol. Nous avons ainsi obtenu jusqu'a 10#6 pci par gramme de matiere fraiche de nodosites, dont 60% restent intacts apres 24h d'incubation. L'activite nitrogenase des suspensions de pci represente moins de 0,2% de celle des nodosites in situ. La perte induite par l'excision, la decoupe et la maceration des nodosites n'excede pas 60% de cette activite initiale, lorsqu'elle est effectuee en microaerobie. Le reste est principalement imputable a des conditions d'incubation defavorable a l'expression de l'activite nitrogenase. L'inclusion des pci dans un gel d'alginate a permis de stimuler 6 a 10 fois cette activite. Avec ce mode d'incubation, la pression d'oxygene optimale pour l'activite des pci apparait superieure a celle des bacteroids libres. Nos resultats suggerent que les cinetiques d'activite reductrice d'acetylene de suspensions de pci presentees dans la litterature, et qui ont toutes ete obtenues en incubant les suspensions en film liquide, refleteraient en fait l'activite nitrogenase des bacteroides liberes par eclatement des pci. Des orientations de recherche sont presentees pour mieux distinguer l'activite nitrogenase des bacteroides et des pci, afin de rendre cet outil operationnel pour l'etude physiologique de ces cellules tres particulieres