Abstract FR:

L'inactivation du cytochrome p450cam, hemoproteine globulaire extraite de pseudomonas putida, induite par la pression hydrostatique, se traduit par une conversion de la forme native en une forme inactive (p420) pour l'hydroxylation du camphre. Les effets des conditions de milieu (substrat, cosolvants et temperature) ainsi qu'une modification ponctuelle de la proteine realisee par mutagenese dirigee ont ete analyses par spectroscopie de fluorescence et d'absorption. Les resultats ont montre que le cytochrome p450cam est tres sensible aux conditions de milieu. Ils suggerent que la transition p450/p420, reversible dans certaines conditions, s'accompagne d'une compression partielle de la poche de l'heme a l'origine du depart du camphre, de l'entree d'une certaine quantite de molecules d'eau et probablement d'un changement de coordination du fer de l'heme. Les variations de volume d'inactivation en presence de substrat refletent les changements d'hydratation de la poche de l'heme. L'addition de cosolvants se traduit par une stabilisation importante de la proteine et conduit parfois a une allure biphasique des courbes de transition p450/p420 qui laisse supposer l'existence d'une espece intermediaire d'inactivation dont l'origine est pour le moment indeterminee