Abstract FR:

Les amidines sont connues comme de puissants inhibiteurs de serine-protéases. Cette inhibition est due à une interaction des fonctions amidines avec le site primaire de fixation de ces enzymes. Dans ce contexte, deux types de supports à base de silice et de polystyrène modifie ont été fonctionnalises soit par des amidines non substituées, soit par des amidines n,n-substituées. La silice a été préalablement enrobée par une couche de polysaccharide modifie afin de minimiser les interactions secondaires et non spécifiques dues a la présence de groupements silanes a la surface de la silice native. L'affinité de ces supports fonctionnalises par les amidines, vis-à-vis de trois serine-protéases (thrombine, plasmine et trypsine) a été étudiée. Cette étude a permis de montrer l'influence de plusieurs caractéristiques structurales de ces enzymes sur leur affinité. Ainsi, de manière analogue à la plasmine, la thrombine possède en dehors de son site primaire de fixation un ou plusieurs sites capables d'interagir avec les amidines non substituées fixées sur le support. La trypsine pour sa part, interagit avec les amidines uniquement par l'intermédiaire de son site primaire de fixation. La chromatographie d'affinité sur ces supports permet d'obtenir à partir d'un échantillon commercial une thrombine de haute pureté avec un rendement de purification d'environ 75%. Dans les mêmes conditions, les performances de séparation obtenues sur un support commercial a base de silice non enrobée, à montre le rôle très important joue par l'enrobage de la silice native par une couche de polysaccharide