Conception d'un biofongicide à base d'enzymes. Application au pelliculage de semences. Production de chitinases par voie bactérienne et synthèse de ligands en vue de leur séparation
Institution:
Paris 13Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
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Abstract FR:
L'objectif de ce travail est la conception d'un biofongicide a base d'enzymes glycolytiques, de type chitinases, capables d'hydrolyser les parois cellulaires de champignons phytopathogenes. L'etude a porte sur la mise au point d'un procede fermentaire discontinu de production des chitinases utilisant la bacterie serratia marcescens. Il a ete montre, d'une part, que des conditions relativement douces d'agitation et d'aeration maximisent la production de ces enzymes. D'autre part, des dosages specifiques de la n-acetyl glucosamine et des experiences d'ultrafiltration ont permis de conclure que la dilution ou l'elimination des chitinases en fin de culture est une condition necessaire pour permettre la reprise de la production. Sur le plan de la caracterisation et de la separation des enzymes produites, les points isoelectriques et les poids moleculaires de deux chitinases majoritaires ont ete determines. Par ailleurs, dans le but de mettre au point un procede de separation liquide/liquide, une strategie de synthese chimique a ete elaboree et a permis l'obtention, en huit etapes, d'un ligand specifique de certaines chitinases. Des preparations multienzymatiques comprenant des chitinases de serratia marcescens ont ete formulees dans le but de realiser la protection de semences. Dans le cas de ble contamine par des champignons du genre fusarium, les taux de contamination ont ete divises par un facteur 17 et cela sans aucune incidence negative sur le taux de germination.