Abstract FR:

Arf (adp-ribosylation factor) est une proteine g monomerique, de 21 kda, identifiee a l'origine comme etant le cofacteur de la toxine du cholera dans la reaction d'adp-ribosylation. Mais son role physiologique se situe dans le trafic des vesicules membranaires. Au niveau de l'appareil de golgi, arf est impliquee dans la formation et la fusion des vesicules. Par ses analogies de sequence en acides amines et la nature de sa modification lipidique, arf s'apparente plus a une sous-unite (g) de proteines g heterotrimeriques qu'a une petite proteine g membre de la super famille ras. Nous avons mis en evidence une autre caracteristique commune entre arf et g: la capacite de former un complexe avec le dimere b(gb). Arf est capable, dans sa conformation inactive d'interagir avec la sous-unite b de transducine (proteine g du systeme visuel). Cette interaction, independante de la presence de la modification lipidique de l'arf, est vraisemblablement permise par la conservation sur arf d'un domaine de g. La presence de ce site sur arf permettrait une connexion entre les voies d'action de ces deux types de proteines g. Arf est myristylee du cote n-terminal. Nous avons etudie l'effet de cette modification lipidique sur l'interaction de la proteine avec les phospholipides de la membrane ainsi que sur l'echange nucleotidique intrinseque ou catalyse par un facteur proteique. L'activation de l'arf stabilise la proteine sur la membrane phospholipidique. Nous demontrons que cette association est independante de la myristylation. De meme, nous montrons que l'activation de l'arf provoque la formation d'un complexe membranaire avec la toxine du cholera, independamment de la myristylation. Dans la forme inactive en revanche, nous observons que la myristylation est responsable d'une liaison partielle de l'arf a la membrane. La presence du myristate sur la proteine modifie la structure du site nucleotidique. Elle favorise la dissociation du gdp et permet, en presence de phospholipides, une activation spontanee. Nous demontrons que la myristylation est essentielle pour l'activation de l'arf par un facteur d'echange dont nous avons mis en evidence l'existence dans la retine