Abstract FR:

Pour comprendre les mecanismes d'action des molecules biologiques et pharmaceutiques, il est souvent necessaire de connaitre leur localisation intracellulaire. Nous proposons dans ce travail une approche originale consistant a visualiser dans les cellules des molecules marquees, soit par des isotopes de periode longue, comme le carbone 14, soit par des isotopes stables d'abondance naturelle faible comme le deuterium, l'azote 15. . . Le microscope ionique utilise pour determiner la localisation de l'isotope marqueur, comporte un faisceau d'ions primaires (o#2#+, cs#+, ga#+. . . ) focalise sur la surface de l'echantillon (cellules etalees, coupe de tissu. . . ). Les ions secondaires emis de l'echantillon sont filtres a l'aide d'un spectrometre de masse qui permet de selectionner les ions correspondant a l'isotope marqueur. Ces ions specifiques sont detectes et leur distribution au niveau de l'echantillon est visualisee avec une resolution atteignant 0,1 micrometre. Dans le cas du carbone 14 la tres haute sensibilite de detection et la presence naturelle quasi nulle nous ont permis d'obtenir des images specifiques de la localisation moleculaire. Par ailleurs des etudes utilisant l'adenine marquee par l'azote 15 et l'arginine marquee par le deuterium, montrent que la microscopie ionique peut egalement visualiser la distribution de molecules marquees a l'aide d'isotopes stables. La microscopie ionique, comparee a la microautoradiographie est une methode plus rapide, au champ d'application plus large. L'utilisation d'isotopes stables ouvre la voie a des etudes chez l'homme. La technique permet aussi, a travers la mesure des rapports isotopiques #1#4c#1#2c, #1#5n/#1#4n, d/h. . , d'evaluer la concentration locale de la molecule etudiee