Caracterisation, clonage et sequencage de deux genes de saccharomyces cerevisiae impliques dans la maturation des arnr et le transport des proteines
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Paris 6Disciplines:
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Ce memoire comprend deux parties: (1) la caracterisation du mutant rna12-1 et le clonage du gene rna12#+; (2) le clonage d'un suppresseur extragenique (sts23) d'un nouveau mutant sec23 (sec23-11). Le mutant rna12-1 et le mutant sec23-11 de la levure s. Cerevisiae presentent differents phenotypes thermosensibles (ts) et une non-accumulation des arn a 37c. La maturation ts dominante dans rna12-1 affecte a la temperature restrictive la maturation des arnr, en particulier la methylation des arnr et l'accumulation des arnm des proteines ribosomales. Le gene rna12#+, clone par complementation du phenotype ts a 32c, code pour une proteine sans homologie avec les proteines connues. La proteine n'est pas essentielle pour la viabilite de la cellule. A partir de ces resultats, nous proposons que la proteine rna12 joue un role non essentiel comme un cofacteur dans la maturation des arnr. Le mutant ts recessif sec23-11 a ete identifie comme un nouvel allele (par rapport a sec23-1 original) du gene sec23 qui intervient dans le transport intracellulaire des proteines. Les deux mutants sec23 sont defectifs a la fois dans le transport des proteines du reticulum endoplasmique vers le golgi et dans l'accumulation des arn a 37c. Un suppresseur extragenique (sts23) a l'etat multicopie, clone par complementation du phenotype ts de sec23-11, supprime partiellement les defauts dans sec23-11 mais peu dans sec23-1. Le produit du gene sts23 qui n'a pas d'homologie avec les proteines connues est essentiel pour la viabilite de la cellule. La suppression de la mutation sec23-11 par sts23 suggere qu'il a une interaction directe entre les produits du gene sec23 et du gene sts23