Abstract FR:

Casuarina equisetifolia et allocasuarina verticillata sont deux especes ligneuses de la famille des casuarinaceae susceptibles d'etablir une symbiose fixatrice d'azote avec un actinomycete, frankia. L'etude de ces especes sur le plan moleculaire a necessite, dans un premier temps, la mise au point de protocoles d'extraction d'acides nucleiques (adn et arn) adaptes. Chez la plupart des especes nodulantes (legumineuses et non-legumineuses), la presence d'hemoglobine dans les nodules a ete mise en evidence. Et chez les casuarinaceae, une forme d'hemoglobine apparemment differente a ete detectee, en tres faible quantite, dans les racines. Dans ce travail, nous avons clone, par amplification en chaine par polymerase, plusieurs fragments d'adn correspondant a des genes d'hemoglobine symbiotique, pour les deux especes etudiees. Les fragments clones s'hybrident specifiquement avec l'arn de nodule de c. Equisetifolia. Les resultats obtenus suggerent l'existence d'une famille multigenique codant pour l'hemoglobine symbiotique chez les deux especes. Un fragment d'adn d'a. Verticillata, homologue a des genes de casuarinaceae qui semblent etre exprimes specifiquement dans les racines, a ete obtenu en utilisant la technique d'amplification en chaine par polymerase et des oligonucleotides prepares a partir de la sequence d'un gene de noduline de legumineuse. Dans l'objectif d'etudier la regulation de l'expression de genes de noduline, il est utile de pouvoir transformer et regenerer l'espece vegetale etudiee. C'est pourquoi, un systeme de transformation genetique d'a. Verticillata par agrobacterium rhizogenes a ete developpe. Des plantes transformees (par le t-dna d'a. Rhizogenes) viables et capables de nodulation ont ete obtenues. En application au systeme de transformation genetique mis au point, des constructions chimeriques constituees de promoteurs derives de celui d'un gene d'hemoglobine de sesbania rostrata et de la sequence codante du gene de la beta-glucuronidase ont ete introduites dans a. Verticillata. L'expression des constructions dans les racines transformees a ete etudiee