Abstract FR:

Afin de caracteriser les canaux hydriques induits par l'hormone antidiuretique, nous avons developpe une technique de biotinylation selective des proteines membranaires de surface applicable a la vessie d'amphibien. Nous avons identifie des proteines de 60, 37, 25 et 19 kda qui pourraient etre des constituants des canaux hydriques. Dans la seconde partie du travail, nous avons etudie l'effet d'une adaptation des animaux a un milieu a salinite elevee. Cette adaptation entraine, in vivo, une augmentation du transport d'uree et d'eau, ainsi que l'apparition d'agregats de particules dans la membrane apicale de la vessie. Parallelement, certaines proteines (53-61, 31, 26 et 19 kda) apparaissent dans leur membrane. La derniere partie du travail a ete consacree a la production d'anticorps diriges contre les composants de la membrane apicale vesicale. Un anticorps polyclonal (a2) et plusieurs monoclonaux ont ete obtenus. Leur specificite contre les proteines de la membrane apicale ou contre des composants de vesicules cytoplasmiques a ete verifiee par immunofluorescence. Une etude comparative effectuee sur le rein de lapin a montre que le serum polyclonal a2 reconnait selectivement le tubule collecteur, un autre tissu sensible a l'hormone antidiuretique. Conjointement au marquage specifique de surface, le developpement d'une gamme d'anticorps ouvre donc la voie a la caracterisation biochimique des proteines reconnues et a une analyse cytochimique detaillee de leur localisation dans la cellule au cours de la reponse hydrosmotique