thesis

La reponse au choc thermique chez streptomyces albus : etude des genes groe et caracterisation de la proteine hsp18

Defense date:

Jan. 1, 1994

Edit

Institution:

Paris 7

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

Pas de résumé disponible.

Abstract FR:

Une elevation brutale de temperature provoque chez tous les etres vivants une augmentation de la synthese de quelques proteines dont certaines, les chaperons, ont un role essentiel dans la vie cellulaire. Les proteines groes et groel appartiennent a cette famille. Chez streptomyces albus deux genes groel (groel1 et groel2) ont ete caracterises. Le gene groel1 precede d'un gene groes code pour une proteine de 58 kda (hsp58) et le gene groel2 code pour une proteine de 56 kda (hsp56). Une proteine de 18 kda, cpn18, correspondant a la partie n-terminale de groel1 a ete egalement purifiee. Afin d'aborder le role physiologique des genes groel, une nouvelle technique d'interruption des genes chez streptomyces a ete mise au point. Un adn non replicatif est introduit par conjugaison d'e. Coli a streptomyces et s'integre par recombinaison homologue. Cette technique nous a permis de montrer que groel2 est indispensable a toute temperature. Le gene groel1 peut etre interrompu de 800 pb, la region du gene codant pour cpn18 semble etre indispensable. L'analyse du mutant groel1 n'a pas permis de determiner une fonction particuliere pour hsp58. En parallele du travail effectue sur groel, une proteine de petit poids moleculaire a ete caracterisee: hsp18. Cette proteine est fortement induite par le choc thermique et est homologue aux antigenes de 14 kda de mycobacterium tuberculosis et de 18 kda de m. Leprae. L'analyse de la transcription a permis de detecter un transcrit fortement induit a 40c, mais non visible a 30c et de cartographier le promoteur p18. La proteine hsp18 possede un role dans le resistance a haute temperature. Une autre partie du travail correspond a l'etude de la regulation de l'expression des genes groel chez s. Albus: ces genes sont soumis a une regulation post-transcriptionnelle. Cette regulation fait intervenir une courte region interne au gene. Des experiences recentes mettent en evidence une regulation traductionnelle: le site de fixation au ribosome et le codon d'initiation semblent pieges par une structure secondaire de l'arnm. Mots clefs: choc thermique, streptomyces albus, groel, hsp18, regulation post-transcriptionnelle