Abstract FR:

Nous avons etudie les mecanismes de transport et de regulation du calcium dans des cultures primaires de tubules contournes distaux brillants (dctb) de rein de lapin selon trois approches experimentales: (1) l'identification et la caracterisation des canaux ioniques de la membrane apicale des cellules par la technique de patch-clamp. (2) la mesure des variations de ca#2#+#i au cours du temps par videomicroscopie de fluorescence sur des cellules de dctb poussant sur des boites de petri et par cytometrie a balayage laser lorsque le support de culture est sur un filtre permeable. Nous avons montre dans la membrane apicale des cellules du dctb l'existence d'un canal calcium active par l'hyperpolarisation, sensible au lanthane, au verapamil et aux dihydropyridines. Ce canal interviendrait dans la reabsorption transepitheliale de calcium. Au niveau basolateral, un echangeur na#+-ca#2#+ sensible a l'amp cyclique permettrait l'extrusion du calcium de la cellule. Par ailleurs, nous avons observe que la calcitonine augmente la ca#2#+#i par une voie independante de l'amp cyclique. Sur la base de certaines donnees de la litterature suggerant l'intervention d'une conductance basolaterale au chlore dans la reabsorption transepitheliale de calcium par la calcitonine, nous avons entrepris l'etude des mouvements de chlore dans les cellules du dctb avec les techniques de cytometrie a balayage laser et de patch-clamp. Nous avons montre qu'il existe dans la membrane apicale des cellules du dctb un canal chlore sensible a l'amp cyclique et dans la membrane basolaterale un canal chlore sensible au calcium intracellulaire. D'apres nos resultats, nous proposons le mecanisme suivant: la calcitonine stimulerait la sortie de chlore par les canaux sensibles a l'amp cyclique et/ou au calcium intracellulaire. La diminution de la concentration intracellulaire de chlore resultante entrainerait une hyperpolarisation membranaire favorisant l'entree de calcium via les canaux presents au niveau de la membrane apicale