Abstract FR:

Les glycopeptides, vancomycine (vm) et teicoplanine (te), inhibent la synthese de la paroi bacterienne en se fixant a l'extremite peptidyl-d-alanyl-d-alanine (d-ala-d-ala) c-terminale des precurseurs du peptidoglycane. La resistance a ces antibiotiques est due a la production de precurseurs termines par le depsipeptide d-alanyl-d-lactate (d-ala-d-lac) qui fixent les glycopeptides avec une affinite tres reduite. Cependant, les enterocoques de type vanb sont sensibles a la te parce que le systeme regulateur a deux composantes vanr b-vans b n'active pas la transcription des genes de resistance en reponse a cet antibiotique. De plus, ces souches presentent souvent un niveau de resistance modere a la vm. Nous avons caracterise les mutations permettant une augmentation du niveau de resistance a la vm ou l'acquisition de la resistance a la te et montre que ces mutations pouvaient etre responsables d'echec therapeutique dans le modele de l'endocardite experimentale chez le lapin. Les mutants hautement resistants a la vm portaient des mutations dans le gene de structure de la d-ala : d-ala ligase de l'hote et ne produisaient pas de precurseurs termines par d-ala-d-ala. L'emergence de la resistance a la te etait due a differentes alterations du capteur vans b. Des substitutions d'acides amines proches du site presume d'autophosphorylation de vans b ont entraine une expression constitutive de la resistance probablement parce que vanr b n'etait pas dephosphoryle en absence de glycopeptides. Les substitutions dans le domaine charniere de vans b ont permis l'induction par la te en affectant la transduction du signal entre les domaines detecteur et kinase. La regulation des genes de resistance dans des cellules individuelles a ete analysee par microscopie de fluorescence et par cytometrie de flux en utilisant le gene indicateur gfpmut 1 codant pour une proteine intrinsequement fluorescente. Cette approche a revele une expression heterogene des genes de resistance en absence de glycopeptides chez un mutant qui ne produisait pas vans b. Les glycopeptides induisaient l'expression des genes de resistance chez une sous-population majoritaire sensible aux glycopeptides revelant une activation de vanr b par une kinase heterologue en reponse aux glycopeptides.