Abstract FR:

Chez les vertebres superieurs, la methylation de l'adn modifie les cytosines engagees dans la sequence palindrome cpg. Cette modification epigenetique se perpetue lors de la replication de l'adn et participerait a plusieurs mecanismes fondamentaux lies a la regulation genetique. En analysant l'expression hypophysaire des genes de la prolactine (prl) et de l'hormone de croissance (gh) de rat, nous illustrons, par des approches a la fois descriptives et fonctionnelles, l'influence negative que la methylation exerce sur l'activite de facteurs transcriptionnels impliques dans la regulation de ces deux genes. Par sequencage genomique de l'adn extrait de lignees cellulaires lactosomatotropes ou de tissus normaux et traite par le bisulfite, nous demontrons que la methylation de sites cpg particuliers, localises sur les promoteurs proximaux des genes de la prl et de la gh, est specifiquement correlee avec la repression de ces genes. En combinant des experiences de transfection et de competition in vivo, nous demontrons l'incapacite des sequences methylees a titrer les facteurs transcriptionnels. Nous avons egalement methyle selectivement des sites cpg du promoteur du gene de la prl insere dans un vecteur d'expression. Apres transfection dans des cellules tumorales lactosomatotropes, l'expression du gene indicateur place sous le controle d'un promoteur ainsi modifie est significativement inhibee, suggerant l'existence d'une relation causale entre methylation et repression. L'ensemble de ces donnees nous permet de proposer un mecanisme d'action mettant en jeu des inhibitions a la fois directes et indirectes de la liaison des facteurs transactivateurs. La place eventuelle de ce phenomene lors de l'ontogenese et de la differenciation adenohypphysaire fait l'objet d'un developpement approfondi