Abstract FR:

Les spectrines/fodrines sont l'un des composants majeurs des squelettes membranaires. Elles sont constituees de deux longues chaines et qui s'associent en tetrameres ()#2 pour former l'unite fonctionnelle de la molecule. Chacune des chaines est composee par la repetition de segments homologues, presentant une structure trihelicoidale, a l'exception du segment 10 qui correspond a un motif sh3 (src homology 3). Les sh3 sont des petits domaines proteiques impliques dans les interactions proteine/proteine. La fonction du domaine sh3 des spectrines et fodrines n'est pas encore caracterisee. La spectrine joue un role important dans les proprietes mecaniques du globule rouge, comme le montre l'etude des anemies hemolytiques associees a une mutation de cette proteine. Nous avons identifie une nouvelle mutation de la chaine spectrine associee, a l'etat homozygote, a un cas de poikilocytose severe. Cette mutation entraine la deletion d'une helice situee immediatement en amont du motif sh3, et pourrait perturber une fonction importante de ce domaine. Afin de caracteriser l'interaction des domaines sh3 spectrine et fodrine avec leurs ligands, nous avons crible une banque de peptides aleatoires exprimes a la surface d'un phage. Nous avons pu definir un nouveau motif consensus d'interaction, h/r x w h/r h/r, different du motif pxxp jusqu'alors defini pour la plupart des domaines sh3. Par ailleurs, le criblage a l'aide du systeme double-hybride, d'une banque d'expression lymphocytaire par le sh3 fodrine, a mis en evidence une interaction entre ce domaine et trois classes de proteines. La premiere classe (e3b1) correspond a des ligands riches en prolines. La deuxieme classe (p70-ku, la sous-unite p27 du proteasome et la hsp86) comprend des proteines tres riches en residus k et e. Dans la troisieme categorie, l'isoforme a de la tyrosine-phosphatase de faible poids moleculaire (lmptp-a) semble particulierement interessante. Cette enzyme cytosolique, initialement isolee a partir de globules rouges, peut egalement interagir avec le sh3 spectrine. Dans le globule rouge, la bande 3 constitue la principale proteine phosphorylee sur residus tyrosine. L'interaction du sh3 spectrine avec la phosphatase lmptp-a pourrait permettre l'adressage de l'enzyme vers son substrat membranaire, la bande 3.