Dissociation de l'unite de cotranscription orf87-nad3-nad1a et deficience du complexe 1 de la chaine respiratoire mitochondriale chez un mutant de developpement male sterile cytoplasmique de nicotiana sylvestris
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Abstract FR:
Chez nicotiana sylvestris, un fragment de restriction mitochondrial saci de 5. 3 kb presente une organisation genique originale comportant une duplication du gene nad3 et d'une phase ouverte de lecture (orf87), associee au premier exon du gene nad1 (nad1/a). Chez la lignee temoin t, ce fragment est implique dans un evenement de recombinaison appele rec1, qui intervient entre nad3 et nad1/a, et genere deux fragments recombinants sous-stoechiometriques dont l'un emporte nad1/a seul. Chez le mutant male sterile cytoplasmique cmsii que nous avons etudie, le fragment recombinant portant nad1/a est amplifie, l'autre etant maintenu a un niveau equivalent a celui observe chez t. Une analyse transcriptionnelle comparee de t et cmsii a montre que la transcription de nad1/a est fortement alteree chez le mutant. Grace a l'obtention d'un anticorps dirige contre une proteine-fusion comportant la partie n terminale de la sous-unite nad1, nous avons pu detecter parmi les proteines membranaires mitochondriales de feuilles et de pollen t, la presence d'un polypeptide d'environ 36 kda peu abondant, synthetise par la mitochondrie qui, absent chez cmsii, pourrait correspondre a la sous-unite nad1 du complexe i mitochondrial. Nos resultats requierent toutefois la verification par microsequencage de la nature de ce polypeptide. L'absence potentielle de nad1 semble correlee avec nos donnees transcriptionnelles, et, au plan physiologique, en accord avec nos predictions. En effet, des tests de respiration realises a partir de mitochondries purifiees ont revele une deficience fonctionnelle du complexe i chez le mutant. Cette deficience respiratoire pourrait toutefois etre egalement liee a la perte deja demontree par ailleurs de la sous-unite nad7 chez cmsii. La perte considerable d'energie qui en resulte pourrait expliquer l'avortement du pollen observe chez cette plante