Abstract FR:

Il y a encore des incertitudes sur les voies de deposition des proteines de reserve du ble et sur l'origine des organelles de reserve. Il a ete suggere que ces proteines peuvent soit s'accumuler dans le reticulum endoplasmique, peut-etre due a des interactions avec bip, soit etre transportees via le golgi pour former des corps proteiques derives de la vacuole. Pour etudier le transport et l'adressage des proteines de reserve du ble, differents signaux d'adressage ont ete associe a une prolamine, la -gliadin. Les differentes formes de cette proteine recombinante ont ete introduites dans nicotiana tabacum. Ces differentes formes consistent de deux -gliadins adressees vers le reticulum endoplasmique (-gliadin/hdel, -gliadin/kdel), d'une -gliadin adressee vers la vacuole (-gliadin/'vac') et d'une -gliadin de type sauvage. Ces constructions ont ete exprimees dans des tabacs transgeniques sous le controle du promoteur camv 35s (contenant la sequence omega, un enhancer de la traduction). Alors que la -gliadin de type sauvage est accumule beaucoup moins que les -gliadins modifiees, toutes les plantes produisent la meme quantite d'arn messager -gliadin. Le signal d'adressage vacuolaire de la -gliadin/'vac' a ete correctement glycosyle mais pas coupe. Des experiences de marquage pulse-chase ont montre que la -gliadin de type sauvage etait tres rapidement degradee, alors que la -gliadin/hdel et la -gliadin/kdel etaient tres stables et que la -gliadin/'vac' etait degradee apres environ 5h de chase. L'addition de brefeldine a aux experiences de pulse-chase a augmente la stabilite de -gliadin type sauvage. Des techniques de fractionnements cellulaires ont montrees que les -gliadins adressees vers le re formaient des corps tres denses associes avec des microsomes derives du re. L'expression de bip n'etait pas induite dans les tabacs transgeniques exprimant la -gliadin de type sauvage