Reparation des cassures double-brin de l'adn par recombinaison homologue, homeologue et illegitime au cours de la transformation de la levure saccharomyces cerevisiae
Institution:
Paris 6Disciplines:
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La premiere partie de ce manuscrit est une revue des donnees concernant la recombinaison homeologue dans differents organismes, les modes de reparation des cassures double-brin par recombinaison homologue ou par recombinaison illegitime et les caracteristiques de certains genes impliques dans ces reparations. Nous avons developpe un systeme experimental pour etudier les differentes voies de reparation, au cours de la transformation de la levure s. Cerevisiae, d'une cassure double-brin plasmidique creee in vitro, par recombinaison avec une sequence partenaire situee sur la meme molecule ou sur une autre molecule. La reparation des cassures double-brin par recombinaison entre des sequences homeologues p450 ayant 73% d'identite est efficace et a lieu par des mechanismes de recombinaison homologue. L'analyse des jonctions de ces chimeres montre qu'elle se situe dans des blocs d'identite de taille variable (4 a 22 nucleotides) partages par les sequences parentales. Lorsque les sequences ont un faible niveau d'identite (52%), la recombinaison homeologue est peu efficace. Les proteines p450 hybrides obtenues ont conserve les activites de l'un ou l'autre des parents ou acquis des activites des deux proteines parentales. Dans la souche sauvage de s. Cerevisiae, les cassures double-brin sont preferentiellement preparees par recombinaison homologue. Dans le mutant rad52, la reparation par recombinaison intermoleculaire est abolie. Par contre, la recombinaison intra moleculaire a lieu mais avec une efficacite faible. Ces resultats sont interpretes dans le cadre des modeles de reparation des cassures double-brin par recombinaison homologue et illegitime