Abstract FR:

La sécrétion de protéines par les microorganismes représente un outil important pour étudier la migration des protéines. De telles études peuvent aussi avoir des répercussions en biotechnologie pour produire des protéines étrangères dans le milieu de culture. La production de nombreuses protéines par Myxococcus xanthus et d’hémolysine par Escherichia coli représentent deux exemples pour aborder la sécrétion de protéines dans le milieu de culture par bactéries à Gram négatif. Chez Myxococcus xanthus, nous avons déterminé la production de l’activité phosphatase acide périplasmique et des activités bactériolytique et protéasique extracellulaires au cours de la croissance, parallèlement aux protéines totales extracellulaires. Ces résultats ont démontré que la présence d’enzymes dans le milieu de culture résulte bien d’un mécanisme de sécrétion. L’obtention et l’étude biochimique et génétique de mutants de transposition affectés dans la production d’enzymes extracellulaires a révélé l’existence d’un mécanisme de sécrétion complexe, régulant la production coordonnée d’une cinquantaine de protéines produites pendant la phase de croissance exponentielle. Chez Escherichia coli nous avons montré que l’hémolysine est une protéine 107Kd sécrétée en phase exponentielle par des souches possédant un déterminant HLY. Un déterminant HLY se compose de quatre gènes contigus appelés hlyC, hlyA, hlyB et hlyD. Le gène hlyA code pour une protéine non hémolytique de 107Kd activée par le produit du gène hlyC. Les formes active ou inactive sont transportées grâce à un mécanisme de transport spécifiques post-traductionnel dont les fonctions sont codées par les gènes hlyB et hlyD. Ces protéines reconnaissent une « séquence topo-génique » de la partie COOH-terminal de la protéine de 107Kd et permettent le passage de la protéine directement du cytoplasme dans le milieu de culture. Les mécanismes de sécrétion chez ces deux bactéries à Gram négatif peuvent représenter des alternatives, pour la sécrétion de protéines d’intérêt industriel, aux systèmes actuellement utilisés.