Origine des gènes de collagène de membrane basale : caractérisation d'un gène primitif chez une éponge marine
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Lyon 1Disciplines:
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Le collagene de type iv est l'un des constituants majeurs des membranes basales. Chez les mammiferes, six chaines de collagene de type iv ont ete mises en evidence que l'on peut repartir en deux groupes en raison de leurs homologies: celles de type alpha1 (alpha1, alpha3 et alpha5) et celles de type alpha2 (alpha2, alpha4 et alpha6). L'organisation et la grande conservation des genes codant pour ces chaines suggerent qu'ils sont issus de duplications d'un meme gene ancestral commun. Afin de mieux comprendre l'origine des genes de collagene de type iv, nous avons decide d'isoler et de caracteriser le ou les genes codant pour un collagene de membrane basale chez un metazoaire parmi les plus primitifs, le spongiaire marin pseudocorticium jarrei. De part la grande conservation de la partie c-terminale des chaines de collagene de type iv nous avons pu, a l'aide d'oligonucleotides de synthese degeneres, couples a la technique de rt-pcr, realiser une sonde adnc specifique. Cette sonde a ete utilisee pour cribler une banque adnc de l'eponge pseudocorticium jarrei. La caracterisation des differents clones positifs nous a permis d'identifier en partie la sequence primaire d'une chaine de collagene de type iv (pjcol4alpha). L'organisation genomique du gene codant pour cette chaine a ete aussi partiellement caracterise. La localisation tissulaire de cette chaine a ete etudiee a l'aide d'anticorps polyclonaux obtenus grace a la production d'une proteine recombinante. Cette localisation correspond a celle de structures comparables a des membranes basales observees en microscopie electronique a transmission, chez cette eponge. L'etude des homologies au niveau nucleique et proteique entre nos sequences et celles obtenues chez differents organismes ont montre que la chaine de collagene de type iv d'eponge possede des caracteristiques des deux sous-familles de chaines. Ces resultats suggerent que la radiation des spongiaires a ete anterieure a la distinction des deux sous-familles de chaines de collagene de type iv