Identification et caracterisation de genes impliques dans la secretion des pectinases et de l'endoglucanase z chez erwinia chrysanthemi
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Pas de résumé disponible.
Abstract FR:
Erwinia chrysanthemi secrete dans le milieu extracellulaire plusieurs enzymes degradatifs qui contribuent a son pouvoir phytopathogene. Des etudes genetiques ont revele l'existence chez e. Chrysanthemi de deux voies distinctes de secretion: une voie specifique aux proteases qui traversent la double barriere membranaire en une seule etape. Leur secretion est dependante des produits de trois genes de secretion specifique; une voie generale empruntee par les pectinases et l'endoglucanase z, la secretion de ces enzymes s'effectue en deux etapes au moins. La translocation des precurseurs a travers la membrane cytoplasmique se fait par un mecanisme dependant de la sequence signal. Les proteines maturees sont par la suite transloquees a travers la membrane externe sous la dependance des produits des genes out. Six genes out, dont les produits sont probablement impliques dans la translocation des pectinases et de l'endoglucanase z a travers la membrane externe de e. Chrysanthemi, ont ete caracterises. Les produits de ces genes dont nous avons determine la sequence nucleotidique, ont ete mis en evidence grace a un systeme d'expression utilisant le promoteur du bacteriophage t7. Pour savoir si les deux cadres de lecture, situes en aval du gene out0 etaient impliques dans la secretion des pectinases et de l'endoglucanase z, nous avons construit des mutants de ces cadres de lecture. L'analyse de leur phenotype a revele qu'ils ne sont pas necessaires a la secretion des pectinases et de l'endoglucanase z. En particulier, les composants du systeme de secretion identifies au cours de ce travail presentent des homologies avec les composants d'appareils de secretion d'autres bacteries: pul de klebsiella oxytoca, out de erwinia carotovora, xcp de pseudomonas aeruginosa et xps de xanthomonas campestris. Le systeme de secretion compose des proteines de ces differentes especes est donc extremement bien conserve, et il n'est pas abusif de la considerer comme la voie generale de secretion