Abstract FR:

La lysyl-arnt synthetase de s. Cerevisiae catalyse le transfert de l'acide amine lysine sur les arnt#l#y#s; cette enzyme est codee par le gene krs1. L'etude de la structure du locus krs1 a permis d'etablir que cette enzyme est codee par un gene unique et indispensable chez z. Cerevisiae, localise sur le chromosome iv a proximite d'un groupe de genes pmr2 repetes en tandem. Chez s. Cerevisiae, les aminoacyl-arnt synthetases presentent des extensions amino-terminales riches en residus lysine, absentes chez les enzymes bacteriennes homologues. L'etude des relations structure-fonction de la lysyl-arnt synthetase a ete realisee apres alteration de son gene de structure par deletion et mutagenese dirigee. Nous avons pu definir une organisation en domaines fonctionnels. Le rapprochement sterique des regions amino- et carboxy-terminales de la proteine, par le biais d'interactions de nature electrostatique, pourrait assurer le positionnement du domaine n-terminal polycationique et contribuer a la stabilisation de la conformation active de l'enzyme. La fonction de ce domaine dans la compartimentation intracellulaire de cette enzyme est suggeree. La transcription du gene krs1 est soumise a deux types de controle: une regulation metabolique s'exercant par l'intermediaire de la proteine rap1 et une regulation impliquant le systeme de controle generale de la biosynthese des acides amines. De plus, l'expression de la lysyl-arnt synthetase est sous le controle d'une regulation negative specifique s'etablissant au niveau post-transcriptionnel. L'etude des aminoacyl-arnt synthetases d'eucaryote superieur revele que ces enzymes ont la faculte de s'associer en complexe multienzymatique. Alors que la lysyl-arnt synthetase de s. Cerevisiae est incapable de s'integrer dans ce complexe quand celle-ci est exprimee dans des cellules de mammifere, ce travail a permis de mettre en evidence un determinant peptidique necessaire a l'association de l'aspartyl-arnt synthetase de rat avec les autres composants du complexe