Abstract FR:

L'enzyme de conversion (eca) (ec 3. 4. 15. 1) est une metallo-dipeptidyl carboxypeptidase a zinc qui joue un role important dans la regulation de la pression arterielle. Elle active l'angiotensine i en angiotensine ii, un puissant vasoconstricteur, et inactive aussi la bradykinine, un puissant vasodilatateur. En 1988, l'adnc de l'eca endotheliale humaine a ete clone dans notre laboratoire, conduisant a la decouverte inattendue de l'organisation de la molecule en deux domaines homologues portant chacun un site actif potentiel. Nous avons etudie la fonction des differents domaines de l'eca a l'aide d'un systeme d'expression dans les cellules d'ovaires d'hamster chinois (cho) et des techniques de mutagenese dirigee. Nous avons montre que l'eca contient en fait deux sites actifs independants: chaque site etant capable de convertir l'angiotensine i en angiotensine ii. En plus, pour chaque site, l'atome de zinc joue un role catalytique essentiel. Et enfin, chaque site est active par l'ion chlorure et inhibe par les inhibiteurs competitifs de l'eca. Les deux sites se differencient par leur activite catalytique et par leur sensibilite a l'ion chlorure. Nous avons aussi montre que l'eca est attachee a la membrane par le segment peptidique hydrophobe proche de son extremite c-terminale. Dans les cellules cho, l'eca membranaire peut subir une modification proteolytique post-traductionnelle dans la region c-terminale pour produire une enzyme soluble. Ce mecanisme de secretion pourrait etre extrapole aux cellules endotheliales qui sont considerees etre a l'origine de l'eca plasmatique qui a aussi une extremite c-terminale tronquee