Abstract FR:

Les oligosaccharides possedent un grand interet biologique et presentent de nombreuses applications therapeutiques. La synthese in vitro de ces composes est importante car il n'est pas souvent possible de les produire par extraction du milieu naturel. Soit parce que leur purification est delicate, soit parce qu'ils sont presents en trop faible quantite. De nombreuses methodes chimiques de ces molecules sont decrites dans la litterature. Cependant, la synthese chimique, du fait des etapes necessaires de protection - deprotection, s'avere longue, delicate, et necessite un bon savoir-faire. Une alternative a ces methodes est apportee par l'utilisation des enzymes. Les glycosylhydrolases peuvent etre utilisees a cet effet car elles presentent une activite en transglycosylation. Leur interet reside dans la possibilite de controler efficacement et rapidement a la fois la stereoselectivite et la regioselectivite du couplage glycosidique. Dans le but de realiser la synthese de disaccharides derives du galactose, nous avons ainsi choisi la voie des galactosidases. L'objectif du travail presente dans cette these est d'etudier les meilleures conditions environnementales qui permettent d'optimiser la synthese des disaccharides. Nous avons ainsi examine le comportement de deux glycosidases : une b-galactosidase issue d'aspergillus oryzae et une b-glycosidase issue d'une bacterie thermophile thermus thermophilus. L'influence de divers parametres sur les performances de la premiere ont ainsi ete examines (activite de l'eau, presence d'un co-solvant organique, activite dans la glace, etudes cinetiques). Les conditions les plus favorables ont ete obtenues avec un nouveau donneur : le vinyl-b-d-galactopyranoside, a basse temperature dans la glace, et sans ajout de co-solvant. Nous avons ainsi pu obtenir un tres bon rendement de 80% de transglycosylation. La versatilite de la seconde enzyme est mise a profit pour realiser des syntheses regioselectives de disaccharides, de type (13), d'interet biologique.