Abstract FR:

L'introduction d'un gene therapeutique dans les progeniteurs hematopoietiques de sang placentaire peut representer une approche du traitement de maladies genetiques ou acquises du systeme sanguin, diagnostiquees durant la grossesse. Nous avons transfere le gene marqueur mcd2 dans les precurseurs cd34#+ de sang de cordon ombilical, par culture sur la lignee d'encapsidation crip produisant le vecteur retroviral amphotrope recombinant mfg. L'expression du transgene a ete analysee dans les sous-populations cd34#+ et suivie par cytometrie en flux. Apres 4 jours de coculture, environ 40% des cellules cd34#+ expriment mcd2, incluant des precurseurs myeloides cd34#+cd33#+ mais aussi des progeniteurs originels cd34#+cd38# et cd34#+thy1#+. La sous-population cd34#+thy1#+ directement triee a partir du sang de cordon est egalement infectable dans des conditions identiques. Ces donnees montrent la susceptibilite de cellules hematopoietiques tres primitives du sang de cordon a l'infection par voie retrovirale. Cultivees in vitro sur des lignees medullaires stromales autorisant la differenciation des cellules souches sanguines humaines, les cellules cd34#+ infectees dans ces conditions y donnent naissance a une descendance de cellules myeloides et lymphoides b exprimant le transgene. Dans le modele de recolonisation in vivo du thymus ftal humain dans la souris scid, les cellules cd34#+ de sang de cordon infectees generent une population de lymphocytes t dans lesquels l'integration et l'expression du transgene mcd2 ont ete respectivement revelees en southern blot et par cytometrie en flux. Ces resultats montrent la persistance d'un gene transduit dans les progeniteurs cd34#+ du sang de cordon ombilical dans differents compartiments cellulaires, myeloide et lymphoides, de leur descendance. En particulier, le maintien de l'expression du transgene marqueur dans la descendance t cd4#+ des progeniteurs transfectes permet d'envisager la transduction dans ces cellules d'un gene inhibant la replication du virus vih. Cette approche experimentale pourra donc contribuer au developpement d'un protocole de therapie genique du sida chez le jeune enfant.