Evaluation de strategies d'obtention de resistances aux virus : application au pelargonium
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
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Abstract FR:
Le virus de la panachure florale (pfbv) est le virus ayant la plus forte incidence economique sur les pelargonium cultives. L'objectif de mes travaux de these a consiste a ameliorer les methodes de diagnostic utilisees pour la detection du pfbv ou des autres viroses du pelargonium et de produire des plantes transgeniques resistantes a certains de ces virus. Dans ce but, j'ai clone et sequence le gene codant pour la proteine capsidiale (cp) du pfbv. Les donnees de sequences obtenues m'ont permis de definir des amorces specifiques du pfbv, qui ont ete utilisees pour la mise au point d'un test de detection par ic/rt-pcr, plus sensible que les tests serologiques. Un gene hybride codant pour la cp du pfbv et deux autres genes hybrides, codant pour une 2,5-oligoadenylate (2-5a) synthetase de rat ou pour une endoribonuclease de schizosaccharomyces pombe (pac 1) specifique des arn doubles brins (arndb) ont ete construits et exprimes dans des pelargonium x zonale. Les resultats preliminaires du premier test de resistance au pfbv semblent indiquer que l'expression des transgenes codant pour la cp du pfbv et la 2-5a synthetase conferent la resistance au pfbv. La seconde partie de mon projet a porte sur les roles des arndb dans l'extinction post-transcriptionnelle de genes (ptgs) et l'effet d'une infection virale sur le ptgs. La rnase pac1, exprimee dans les tabacs transgeniques, active le ptgs des genes endogenes codant pour la nitrite reductase (nii) et du transgene 35s-nii. Puisque cette rnase peut cliver des arndb et produire des fragments d'arn de petite taille, ces resultats confirment le role crucial des arndb en tant que signal du ptgs. Ces observations constituent le premier cas d'activation du ptgs de genes endogenes par un transgene ne partageant aucune similitude de sequence avec les genes cibles. Nous avons egalement demontre que l'infection par le cmv de tabacs transgeniques manifestant la co-suppression des (trans)genes codant pour la nitrate reductase (nia) ou le ptgs d'un transgene codant pour la -glucuronidase (uida) pouvait inhiber le ptgs de ces (trans)genes. Nos resultats, ainsi que ceux de travaux recents, suggerent qu'il serait possible dans un avenir proche, de controler les effets du ptgs en co-exprimant le gene d'interet avec une proteine virale ou avec la rnase pac1 dans des plantes transgeniques.