Abstract FR:

Le but de ce travail etait de caracteriser les proteoglycannes (pg) synthetises par les cellules de sertoli de rat en culture. Ces cellules ont ete incubees pendant 48 h en presence de (#3#5s)-sulfate. Apres recuperation du milieu de culture, le tapis cellulaire est extrait sequentiellement avec: 1) pbs contenant 100 g/ml d'heparine (extrait pericellulaire); 2) 0,2% triton x-100 (extrait membranaire et intracellulaire); 3) uree 4m, 1% triton x-100 (extrait matrice extracellulaire). Les macromolecules (#3#5s) du milieu correspondent a trois types de pg: un pg a heparanne sulfate (hspg) (25%), un pg a chondroitine sulfate (cspg) (25%) et un pg mixte (hscspg) (50%) dont les chaines de cs sont plus courtes que celles du cspg. Dans le materiel pericellulaire, deux pg differents ont ete detectes: un hspg (70%) et cspg (30%) de poids moleculaires tres voisins. Dans la matrice extracellulaire, un pg unique a ete mis en evidence; l'axe proteique de ce pg porte a la fois des chaines de hs et de cs. L'extrait membranaire et intracellulaire contient 20% de materiel hydrophobe correspondant a du hspg; ce materiel peut etre insere dans des liposomes, montrant que ce pg pourrait etre ancre dans la membrane plasmique. Dans le but d'etudier cette possibilite, les membranes de cellules de sertoli ont ete isolees et soumises a l'action du triton x-100. Le pg solubilise a partir des membranes est identique (meme pm, memes chaines d'hs) au pg hydrophobe de l'extrait triton du tapis cellulaire, prouvant que ce materiel est bien issu des membranes cellulaires. Le mode d'ancrage des pg dans la membrane cellulaire a ete etudie par digestions sequentielles des cellules de sertoli avec la trypsine et la phospholipase c specifique du phosphatidylinositol. Cette experience a montre que 65% des pg sont ancres dans la membrane par un segment hydrophobe de la core protein et 35% a travers un phosphatidylinositol lie au pg par une liaison covalente