Abstract FR:

L'hydrolyse des phospholipides membranaires est a l'origine des deux signaux ioniques responsables du reveil metabolique de la plupart des cellules aussi bien somatiques que germinales: l'augmentation rapide et transitoire de la concentration en calcium libre et l'elevation durable du ph intracellulaire. Nous avons choisi comme support experimental les gametes femelle d'invertebres marins. En effet, la possibilite d'utiliser des ovocytes provenant d'especes differents (oursin et patelle) et pouvant etre actives a differents stades de la meiose nous a permis de dissequer l'implication de ces lipides a trois niveaux du developpement embryonnaire: 1. Lors de la maturation de l'ovocyte de patelle (bloque en prophase 1), qui ne s'accompagne que d'une alcalinisation intracellulaire: il a ete mis en evidence une synthese de novo de l'ensemble des ppi (pi, pip, pip#2) concomitante a une acceleration du taux de renouvellement de ces lipides. Une des consequences de la maturation serait donc de constituer une reserve de ppi importante et disponible pour permettre une production massive d'ip3 responsable du signal calcique induit a la fecondation. 2. Lors de la fecondation de l'ovocyte d'oursin (qui a acheve ses divisions meiotiques), pendant laquelle les deux signaux ioniques calcium et ph apparaissent liees: le metabolisme des polyphosphoinositides est active des les premieres secondes qui suivent l'interaction spermatozoide/uf. Il semble cependant exister une ou plusieurs etapes anterieures a l'activation de la plc. Il a ete mis en evidence une augmentation de la phosphorylation sur tyrosine de deux proteines susceptibles d'etre gap et plc. Ce phenomene, se produisant avant l'apparition du signal calcique, pourrait constituer l'une des etapes necessaires a l'activation du metabolisme des ppi. 3. Lors des etapes ulterieures de la differentiation cellulaire precoce: plusieurs evenements morphologiques ponctuent le premier cycle de division de l'uf d'oursin, en particulier la rupture de la membrane nucleaire, la mitose puis la cytokinese. Outre le pic de calcium libre apparaissant dans les premieres minutes suivant la fecondation, d'autres pics de calcium coincidant avec ces differentes phases ont ete decrits. Nous avons mis en evidence deux diminutions successives de l'incorporation d'un marqueur radioactif dans les pip#2, coincidant avec la rupture de la membrane nucleaire et la cytokinese. Nous avons egalement observe une tres forte production d'ip#3#-#1#,#4#,#5 au moment de la cytokinese. Cet ip3 est ensuite transforme en ip#4#-#1#,#3#,#4#,#5 qui est lui meme degrade en ip#3#-#1#,#3#,#4