Abstract FR:

Les proteines de 24, 22,5 et 22 kda du facteur de croissance fibroblastique basique (fgf-2) contiennent des motifs nls-like responsable de leur localisation nucleaire. Alors que la proteine de 18kda agit via des recepteurs membranaires specifiques, le mode d'action des grandes isoformes demeure inconnu. Nous avons cherche a caracteriser les genes cibles de l'isoforme 24 kda fgf-2. Des modeles cellulaires humains (hela) et murins (nih-3t3) surexprimant le 24 kda fgf-2 ont ete construits. Un systeme inductible a de plus ete developpe dans les hela, de facon a reguler la localisation de cette isoforme par addition d'stradiol dans le milieu de culture (systeme de proteines chimeres avec le domaine de liaison a l'hormone du recepteur des strogenes). Les proprietes phenotypiques de ces lignees ont ete caracterisees a l'aide de tests de proliferation cellulaire et de radioresistance. Afin d'evaluer l'action du 24 kda fgf-2 sur la regulation genique, nous avons utilise deux approches distinctes. D'une part, l'interleukine-6 (il-6) a ete retenue comme gene cible potentiel en raison de travaux reliant son expression et ses activites biologiques a celles du fgf-2. Sur les nih-3t3, des etudes d'expression d'arnm et d'activite du promoteur il-6, montrent que l'activite du gene il-6 est stimulee par le 24 kda fgf-2. Cet effet est dose-dependant et inverse a celui observe en presence de 18 kda fgf-2 extracellulaire. Dans la lignee cancereuse hela, nous avons caracterise une regulation opposee du 24 kda fgf-2 sur le promoteur de l'il-6, l'activite de ce dernier etant inhibee de facon specifique et dose-dependante par le facteur de croissance, alors que le fgf-2 extracellulaire est sans effet. L'approche alternative de ce sujet de recherche a consiste a comparer des profils d'expressions differentielles des arnm (ddrt-pcr) dans nos modeles cellulaires. Nous avons notamment isole un adnc regule, homologue a une region non traduite de l'arnm bicistronique codant pour la phosphoproteine pea15 et le protooncogene mat1.