Etude de la reponse a une carence en glucose chez enterococcus faecalis jh2-2
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L'observation microscopique, l'etude de l'acquisition de resistances a divers agents physicochimiques et de la survie au cours de la phase stationnaire provoquee par une carence en glucose ont ete realisees chez enterococcus faecalis jh2-2. Comparees a des cellules en croissance, les cellules carencees en source energetique survivent mieux a des traitements letaux comme la temperature, l'ethanol, le peroxyde d'hydrogene ou le ph acide. Cependant, les amplitudes et les cinetiques d'acquisition de resistances sont differentes selon l'agent etudie. L'implication de la synthese proteique dans la survie des cellules et dans la protection face a ces agents ne semble pas obligatoire. En effet, le traitement au chloramphenicol n'empeche pas l'acquisition d'une resistance ethanolique. Par contre, l'arret de la synthese proteique durant la phase transitoire et durant les 3 premieres heures de phase stationnaire inhibe partiellement l'evolution des resistances acide, thermique ou oxydative et affecte le potentiel de survie a long terme des bacteries. L'analyse des spectres proteiques obtenus par electrophorese bidimensionnelle nous a permis d'identifier 42 proteines specifiques de la phase stationnaire provoquee par une carence en glucose. Celles-ci ont ete reparties en 4 classes majeures definies d'apres la periode de leur synthese au cours de la phase stationnaire. Les proteines dont la synthese est la plus precoce semblent jouer un role preponderant dans la survie et l'acquisition de certaines resistances. Nous avons obtenu les sequences partielles en acides amines de deux d'entre elles. La premiere presente une tres forte homologie avec la sequence de la carbamate kinase de s. Faecium qui catalyse une des etapes du metabolisme de l'arginine. La seconde, ne presentant aucune homologie avec les sequences n-terminales de proteines connues, nous a conduit a utiliser la methode de genetique inverse afin de caracteriser et d'identifier le gene correspondant.