Abstract FR:

La toxine adenylcyclase (ac) de bordetella pertussis est une proteine bifonctionnelle de 1706 residus qui a la particularite d'etre activee par la calmoduline (cam), proteine d'origine eucaryote. L'activite cyclase est portee par les 400 premiers residus tandis que le reste de la molecule est implique dans la secretion et l'invasivite de la toxine. L'etude des proprietes catalytiques de l'ac de b. Pertussis a permis de supposer l'intervention d'une histidine dans la cyclisation de l'atp. L'analyse de plusieurs formes modifiees d'enzyme, obtenues par mutagenese dirigee, a confirme que l'his63 participait a la catalyse par l'intermediaire d'un systeme de relais de charge. L'interaction du domaine catalytique de l'ac avec la cam est due principalement a des effets hydrophobes. Plusieurs peptides issus de l'ac, variant de 20 a 72 acides amines, ont ete produits et analyses par resonance magnetique nucleaire (rmn) ou fluorescence. Nous avons montre que la sequence pro#1#9#6-met#2#6#7 de l'ac porte, a elle seule, 90% de l'energie d'interaction avec l'activateur. L'analyse par rmn du peptide p#1#9#6#-#2#6#7 indique une organisation en structure helice-tour-helice. Les deplacements chimiques (#1h et #1#5n#) de la sequence leu#2#4#0#-val#2#5#7 de l'ac sont modifies apres fixation de la cam. Ce type de structure pourrait etre conserve dans la proteine entiere. En effet, l'environnement du trp242, seul ou en complexe avec la cam, comme l'ont demontre les experiences de fluorescence impulsionnelle, est similaire dans les differentes analyses des peptides et de l'enzyme