thesis

La survie de sinorhizobium meliloti a la dessiccation : role des molecules osmoprotectrices et des glucides. clonage d'un systeme de transport du fructose

Defense date:

Jan. 1, 1998

Edit

Institution:

Nice

Disciplines:

Authors:

Abstract EN:

Pas de résumé disponible.

Abstract FR:

L'etude de l'amelioration de la survie de s. Meliloti apres dessiccation lors du pelliculage des bacteries sur les semences de luzerne a ete realisee dans le cadre du programme bioavenir, en collaboration avec rhone-poulenc ceres. Un test de dessiccation sur filtre a montre que l'accumulation intracellulaire de glycine betaine n'a pas d'effet benefique sur la survie de s. Meliloti apres une deshydratation de 24 heures a 26c sous 30-50% d'humidite. Au contraire, la formulation de l'inoculum bacterien en presence de 300 mm de glycine betaine au moment du depot sur filtre ameliore sensiblement la survie. Des glucides comme le trehalose, le saccharose ou le fructose ont montre une efficacite superieure a celle de la glycine betaine. Alors que le taux moyen de survie en l'absence de glucide ne depasse pas 7%, il atteint 50 a 70% en leur presence. Un meme traitement des inoculum avant pelliculage des bacteries sur semences permet de maintenir la charge en bacteries viables a plus de 1000 bacteries/semence apres 2 mois de conservation a 26c. Un mutant tnphoa de s. Meliloti ne transportant plus le fructose est toujours protege par l'addition de fructose. L'effet protecteur du glucide n'est donc pas lie a un transport actif. Les mecanismes mis en jeu pendant la phase critique de deshydratation sont physico-chimiques. Un systeme de transport de fructose a ete clone et sequence. Il s'agit d'un transporteur de type abc a proteine periplasmique (35 kda) a forte affinite (k#m apparent de 6 m). Quatre orfs ont ete identifiees ; trois codent des proteines presentant une identite significative avec les genes rbs du transporteur abc de ribose chez r. Capsulatus. En amont de ces trois genes, transcrit de facon divergente, un quatrieme gene code une proteine homologue au represseur du transport de xylose. Un second mutant ayant perdu la capacite de croitre a partir du trehalose a ete obtenu ; le transposon tnphoa est egalement insere dans un systeme de transport de type abc.