L'expression heterologue dans saccharomyces cerevisiae du gene t-urf13, responsable de la sterilite male cytoplasmique texas du mais : de l'acquisition de la sensibilite a la restauration de la resistance
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Nous nous sommes interesses chez le mais, parmi les trois types de sterilite male cytoplasmique ou cms decrits et distinguables par les genes nucleaires dominants restaurateurs de la fertilite male, a la cms texas ou cmst. Le gene urf13tw derive du gene mitochondrial t-urf13, implique dans le phenotype de cmst mais egalement dans une sensibilite specifique des mitochondries du mais cmst a la toxine produite par un champignon pathogene et au methomyl, un analogue fonctionnel, a ete introduit par transformation dans le genome nucleaire de la levure s. Cerevisiae. Le produit de traduction du gene urf13tw a ete dirige dans la membrane interne mitochondriale de la levure a l'aide d'un peptide signal n terminal. La levure ainsi transformee, appelee tw, acquiert la sensibilite a la toxine et au methomyl. L'interaction entre la proteine urf13tw et la toxine ou le methomyl, induit un disfonctionnement au niveau de la mitochondrie de la levure tw, et a une action decouplante. Dans ce systeme heterologue, un allele dominant d'un gene nucleaire de la levure, appele mrg1, a ete isole, apres mutagenese et criblage de 25000 croisements individuels, comme un allele restaurateur de la resistance au methomyl. L'allele mrg1, permet la croissance de la levure tw malgre le decouplage induit par l'interaction entre la proteine urf13tw et la toxine ou le methomyl. Le metabolisme respiratoire de la levure portant l'allele mrg1 est considerablement modifie et son rendement de croissance est affecte suggerant qu'un etat partiellement decouple est associe a la presence de mrg1