Abstract FR:

Notre etude porte sur la reponse des melanocytes humains normaux et tumoraux a l'irradiation ultraviolette. Bien que l'induction de la pigmentation en reponse a l'irradiation ultraviolette in vivo et in vitro soit bien documentee, les mecanismes intracellulaires impliques dans cette reponse ne sont pas encore completement elucides. Nous avons montre que les dinucleotides de thymidine ptpt, qui pourraient mimer les fragments d'adn leses et excises apres irradiation uvb, induisent la melanogenese dans les melanocytes humains. Un ralentissement de la proliferation et un arret des cellules en phase s sont induits par les dinucleotides de thymidine et la synthese de melanine se produit specifiquement en presence de la forme dimerique de la thymidine. L'integrite des systemes de reparation de l'adn est necessaire pour le declenchement de la synthese de melanine par les dinucleotides de thymidine. Ainsi, une nouvelle voie d'activation de la synthese de melanine en reponse a l'irradiation uv, passant par les lesions induites par l'uv sur l'adn et par la reparation de ces lesions est mise en evidence ; ceci pourrait correspondre a une reponse de type sos chez l'homme. Dans le meme temps, nous avons etudie la participation de la proteine p53 aux reponses cellulaires (survie/apoptose, proliferation, cycle cellulaire) apres irradiation uv a differentes longueurs d'onde. Nos travaux ont montre que p53 est activee a la fois apres irradiation uvb et uvc. Une forte apoptose independante de p53 est declenchee et un arret en phase g2/m est observe en reponse a l'irradiation uvb. Nous avons montre que la proteine p53 pourrait avoir un role dans le controle du point g2/m apres uvb et protegerait ainsi les cellules contre l'apoptose et une mitose anormale. Nous avons mis au point une methode de rt-pcr semi-quantitative permettant l'analyse rapide et en une seule fois de la variation des transcrits des genes effecteurs de p53 (p21 w a f i, mdm2, cyclineg1, gadd45, bax). Apres irradiation uvc, tous les genes effecteurs etudies sont induits. Apres irradiation uvb a 50 j/m 2 tous les genes testes sont induits ; par contre, a 150j/m 2 seul le gene gadd45 est induit. Cette induction de gadd45 apparait etre specifique du melanocyte puisqu'elle n'a pas ete retrouvee dans d'autres types cellulaires (fibroblastes, keratinocytes).