Abstract FR:

Des canaux jonctionnels formes par les connexines (cx) de rat 43, 32 ou 26 induites apres transfection de leurs genes dans des lignees cellulaires deficientes en cx ont montre des permeabilites selectives differentes liees a la taille et a la charge de molecules fluorescentes. Les souches sauvages, les trois clones hela/cx43, 32 ou 26 et le clone skhep/cx43 ont ete fournis par deux laboratoires dans le cadre d'un contrat de recherche des communautes europeennes. L'immunomarquage des clones hela/cx43, 32 et 26 revele des connexines associees aux contacts cellulaires. Les permeabilites sont quantifiees par la technique du retour de fluorescence apres photoblanchiment (gap-frap). La mesure de la constante de temps (min) du retour de fluorescence dans une cellule photoblanchie, par le flux diffusionnel venant des cellules voisines, donne la constante de permeabilite relative (k min 1). Cinq traceurs de diffusion derives de la fluoresceine differant par les masses molaires et par le nombre de charges negatives (376 2 , 445 2 , 515 5 618 5 et 880 6 da) ont ete selectionnes. La communication est tres faible dans les souches sauvages. Dans la lignee hela, k = 0. 006 pour le traceur de 376 da avec 6. 5% de couplage. Dans la lignee skhep, k = 0. 005 avec 3% de couplage. La permeabilite des canaux formes de cx43 diminue en fonction de l'augmentation du poids moleculaire du traceur. Les constantes k les plus elevees (0. 122 et 0. 1) sont observees pour le traceur de 376da et les plus faibles (0. 036 et 0. 04) pour le traceur de 880da. Ce canal est tres peu permeable aux molecules dont la masse approche 900da. La permeabilite des canaux formes de cx32 diminue plus vite dans l'intervalle 376-515da que dans l'intervalle 515-800da ou aucune variation significative n'est etablie jusqu'a 880da. Le passage plus facile de molecules lourdes coincide avec leur charge negative plus grande. La selectivite de ce canal pourrait alors s'expliquer par une charge fixe positive plus importante que celle des autres canaux. La permeabilite des canaux formes de cx26 diminue plus rapidement que celle des autres canaux dans l'intervalle 400 a 500da. La permeabilite diminue moins vite, dans l'intervalle 500 a 800da. Ce canal serait le plus restrictif. La charge negative croissante des molecules ne semble pas faciliter leur passage a travers ce canal dont la taille limite de passage, est voisine de 1000da.