Abstract FR:

Dans la premiere partie de ce travail, nous avons mis au point une methode de cytochimie quantitative pour mesurer l'activite de la na-k-atpase dans une lignee cellulaire mdck, cultivee en milieu defini. Dans la deuxieme partie, la regulation de cette enzyme sous l'influence de l'aldosterone et des activateurs de la proteine kinase c(pkc) a ete abordee. Les principaux resultats sont les suivants: 1) l'aldosterone induit une augmentation de l'activite na-k-atpase et de la liaison d'ouabaine des 15 minutes, atteignant un maximum a 120 minutes. Les inhibiteurs de synthese de proteines reduisent l'augmentation tardive (120 minutes) d'activite atpasique, sans avoir d'effet a des temps plus precoces. Pendant la phase precoce, l'effet stimulant de l'aldosterone est supprime en presence de colchicine et de dma, suggerant que l'aldosterone produirait un recrutement ou une activation de pompes deja presentes. La phase tardive, inhibee par le cycloheximide releverait d'une neosynthese de pompes; 2) activateurs de la pkc. Divers activateurs de la pkc (pma, dag, dic8) inhibent d'environ 50% l'activite na-k-atpase, de facon dependante du temps et de la concentration. Leur effet est supprime par les inhibiteurs de la pkc et la sphingosine, mais non par les inhibiteurs de la synthese proteique. L'effet inhibiteur du pma se cumule avec celui du furosemide, mais non avec celui de l'amiloride. Ces resultats suggerent que l'effet de l'activation de la pkc aboutissant a une reduction de l'activite na-k-atpase pourrait passer par une reduction de l'entree de sodium dans la cellule, peut etre via le canal amiloride sensible