Abstract FR:

Cette these repose sur l'application de la chromatographie d'affinite (zonale) conventionnelle (cac) et haute performance (cahp) a l'etude des interactions de la lipase (ou ses isolipases, ou sa sequence c terminale) d'une part, et la colipase, d'autre part. Les constantes de dissociations k::(d) du complexe calculees en cac et cahp sont voisines des valeurs mesurees par d'autres techniques non chromatographiques dans des conditions operatoires similaires. La cahp est une technique qui permet de determiner rapidement la stabilite du complexe lipase/colipase. L'influence de parametres physiques et physico-chimiques montre que la nature des interactions lipase/colipase est mixte, de type hydrophobe et ionique. En cahp les isolipases a et c presentent une affinite plus faible que l'isolipase b pour le cofacteur immobilise. Le peptide b, region c terminale de l'enzyme, engage des interactions specifiques avec la colipase, ce qui laisse supposer que le site d'association de la lipase avec son cofacteur se situe dans la region 336-449