Abstract FR:

Le phosphatidylinositol (pi) represente 4 a 16% des phospholipides membranaires. Avec ses derives phosphoryles (pip et pip#2), il serait implique dans la transduction intracellulaire de divers signaux exterieurs. Sa biosynthese est majoritairement associee aux membranes du reticulum endoplasmique grace a la phosphatidylinositol synthetase qui n'a jamais ete purifiee a ce jour a partir de vegetaux superieurs. La presence du phosphatidylinositol dans le plasmalemme pourrait s'expliquer soit par transferts vesiculaires, soit par des proteines de transfert de lipides. La pi synthetase a ete solubilisee a partir de microsomes de plantules de mais a l'aide d'un detergent zwitterionique le chaps avec un rapport detergent/proteine egal a 3. Le complexe detergent-pi synthetase a ensuite ete purifie en utilisant une colonne d'affinite, la cdp-dag sepharose-4b suivie d'une colonne echangeuse d'ions (mono-q) connectee a un equipement fplc. Le facteur de purification obtenu est egal a 800. La masse moleculaire de l'enzyme a ete estimee par une electrophorese denaturante en presence de sds a 64 kda. La pi synthetase synthetise preferentiellement deux especes moleculaires majoritaires pi c16:0/c18:2 et pi c16:0/c18:3. Le pi synthetise exclusivement au niveau du reticulum endoplasmique est transfere in vitro de son lieu de synthese vers le plasmalemme (lieu de sa metabolisation) et vers d'autres membranes. Ce transfert est tres fortement stimule par la proteine de transfert de lipides (ltp) isolee a partir de graines de mais. Ces resultats ouvrent de nouvelles perspectives pour etudier la dynamique du pi dans les cellules vegetales