Etude de la regulation transcriptionnelle d'un element transposable de type retroviral chez la drosophile : l'element copia de d. melanogaster
Institution:
Paris 7Disciplines:
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Abstract EN:
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Abstract FR:
Le genome de la drosophile possede de nombreuses copies d'elements transposables de type retroviral. Au cours de leur transposition ces elements mobiles passent par une etape necessaire de transcription. Une correlation directe existe entre le taux de transcription des retrotransposons et leur taux de transposition. Il est donc essentiel d'identifier et de caracteriser les facteurs de l'hote susceptibles de moduler la transcription et la transposition de ce type de transposons. Nous avons premierement identifie dans la region transcrite et non traduite du transposon copia, un element de reponse aux homeoproteines (hpre). A l'aide de vecteurs d'expression codant differentes homeoproteines, nous avons montre que les proteines fushi tarazu et zerknullt activent la transcription de copia (jusqu'a trente fois), alors que les proteines engrailed et evenskipped l'inhibent. Deux sites de fixation pour les homeoproteines ont pu etre identifies grace aux techniques de migration retardee sur gel et d'empreinte a la dnaase i. L'etablissement de lignees d'animaux transgeniques a demontre la fonctionnalite de ces sites in vivo. Nous avons par ailleurs mis en evidence une sequence enhancer longue de 72 paires de bases en aval de la region hpre. Elle est responsable de l'activation (facteur 500) du promoteur de copia dans les cellules dh-33 (derivees de l'espece d. Hydei ne possedant pas d'elements copia endogenes) et n'a pas d'effet dans les cellules sii (derivees de d. Melanogaster et possedant une centaine d'elements copia). Correlativement les extraits proteiques issus de cellules dh-33 possedent un facteur se liant specifiquement a la region enhancer alors que les cellules sii en sont depourvues. A l'aide d'une banque d'expression etablie a partir des arns de cellules dh-33 nous avons clone un nouveau facteur transcriptionnel possedant deux doigts a zinc, des domaines riches en residus glutamine et un domaine btb, capable d'activer fortement la transcription de l'element copia