Abstract FR:

Cette etude a permis d'etablir un protocole de cryoconservation de jeunes embryons somatiques de picea abies. La reprise de croissance apres une congelation dans l'azote liquide varie selon les clones et en fonction de certains parametres experimentaux: mode de culture, concentration en saccharose pendant le pretraitement, nature et concentration des cryoprotecteurs (dmso, propanediol), vitesse de refroidissement, temperature de prerefroidissement. D'autres facteurs comme la vitesse de rechauffement ont un effet peu marque. Les cultures embryogenes d'epicea sont constituees uniquement de structures embryonnaires. La reprise de croissance apres la congelation se fait par l'elaboration directe de nouveaux proembryoides a partir des proembryoides congeles, meme si le taux de survie cellulaire est faible. Le temps de latence est inferieur a 3 jours dans les meilleurs cas. Les premieres mitoses ont lieu quelques heures seulement apres la remise en culture des echantillons congeles. Un fait remarquable est la possibilite de rajeunir les cultures d'epicea par leur congelation dans l'azote liquide. La congelation opere un tri selectif tres important parmi les differents types cellulaires apparus lors de la degenerescence de la souche: seules les cellules les plus meristematiques des proembryoides proliferent. La conservation dans l'azote liquide de cultures embryogenes de picea abies est possible pour la majorite des clones que nous avons pu tester et la constitution d'une banque de clones est envisageable. Ce procede de cryoconservation pourra etre applique egalement a d'autres especes de coniferes