Abstract FR:

Deux mutants de levure saccharomyces cerevisiae, vl134 et vl135, auxotrophes pour l'ergosterol et bloques dans l'activite farnesyl diphosphate (erg20) ont ete isoles. Les mutations affectant la farnesyl diphosphate synthetase des souches vl134 et vl135 ont ete notees respectivement erg20-1 et erg20-2. La particularite de ces souches mutantes est leur capacite a excreter des terpenes aromatiques (farnesol et geraniol dans le cas de vl134 et farnesol dans le cas de vl135). L'analyse genetique de ces souches a montre que d'autres mutations sur des genes de la voie de biosynthese de l'ergosterol etaient presentes et indispensables a leur viabilite. Le role est tres vraisemblablement de diminuer la synthese du geraniol, toxique pour les cellules de levure. Nous avons isole le gene fonctionnel erg20 de levure par complementation de la mutation erg20-2. Le fragment isole a une taille de 5,7 kb qui a pu etre reduit a 3 kb sans perte de l'activite. Nous avons montre qu'une souche haploide portant une copie chromosomique du gene erg20 et une copie extrachromosomique, presente une augmentation de 28% du taux de sterol, ce qui suggere fortement que la farnesyl diphosphate synthetase pourrait etre une enzyme limitante dans la voie de biosynthese des sterols chez la levure. Par contre, une souche haploide porteuse du gene erg20 sur un plasmide replicatif (de 20 a 50 copies du plasmide par cellule), presente une teneur en sterols identique a celle de la souche sauvage, ce qui peut s'expliquer par l'existence de mecanismes de regulation qui auraient pour role de prevenir une eventuelle accumulation de sterols