thesis

Caracterisation de la specificite des thioredoxines h de plantes par complementation fonctionnelle de la levure saccharomyces cerevisiae

Defense date:

Jan. 1, 1998

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Institution:

Toulouse 3

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Authors:

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Abstract FR:

(. . . ) alors que l'homme ne possede que 2 genes de thioredoxine, les plantes presentent une plus grande diversite. Arabidopsis thaliana par exemple a 5 genes codant des thioredoxines cytoplasmiques et plusieurs autres codant des thioredoxines chloroplastiques. Cette diversite pose la question de la redondance ou de la specificite de fonction de ces genes. Pour repondre a cette question nous avons developpe une approche in vivo puisque l'ensemble des thioredoxines h d'arabidopsis montrent la meme activite in vitro sur des substrats modeles. Cette approche est fondee sur la complementation d'un double mutant thioredoxine de levure. (. . . ) nous avons exprime 8 thioredoxines de plante (6 cytoplasmiques et 2 chloroplastiques) dans le double mutant trx1, trx2 et analyse les differents phenotypes cites ci-dessus. (. . . ) dans le but de determiner ce qui dans la thioredoxine peut etre responsable de la specificite, nous avons entame dans la seconde partie de ce travail, l'etude de l'aspect structural de l'interaction de la thioredoxine avec la cible et ce par le biais de thioredoxines hybrides. Dans le precedent chapitre, nous avions montre que la thioredoxine 2 d'arabidopsis complementait pour l'assimilation du sulfate alors que la thioredoxine 3 complementait pour la resistance a h#2o#2. Nous avons cherche a analyser l'effet d'une proteine chimerique constituee par la partie n-terminale de la thioredoxine 2 et le site actif ainsi que la partie c-terminale de la thioredoxine 3. (. . . ) dans le chapitre 3 de la these, je decrit l'isolement d'un nouvel adnc d'arabidopsis thaliana par complementation fonctionnelle du double mutant thioredoxine de levure emy63. Cet adnc code une proteine (tdx) de 383 acides amines contenant 2 domaines distincts. Un domaine n-terminal caracterise par 3 repetitions d'un motif degenere de 34 residus, appele tetratricopeptide. Ce domaine est homologue a une proteine chaperon (hip) de vertebres qui interagit avec hsp70, et un domaine c-terminal homologue aux thioredoxines h. Nous avons isole et entierement sequence le gene codant tdx. (. . . )