thesis

Introduction chez brassica oleracea l. Var. Botrytis l. De genes du virus de la mosaique du chou-fleur (camv) via agrobacterium tumefaciens

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Rennes 1

Disciplines:

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Abstract FR:

L'expression de genes viraux dans des plantes transgeniques constitue une strategie efficace pour lutter contre les viroses vegetales. Afin d'obtenir une resistance au virus de la mosaique du chou-fleur (camv), la transformation genetique du chou-fleur (brassica oleracea l. Var. Botrytis l. ) a ete entreprise dans cette etude. Le gene iv (proteine de capside) et le gene vi (proteine des viroplasmes) du camv ont ete choisis pour etre transferes dans le genome de la plante. Deux strategies ont ete envisagees, soit l'expression chez la plante de la proteine de capside, soit l'expression d'un arn antisens du gene vi. Les genes viraux ont ete clones dans un vecteur binaire, puis les constructions obtenues ont ete introduites dans une souche desarmee d'a. Tumefaciens. Deux methodes de transformation via a. Tumefaciens ont ete experimentees. La premiere a ete menee sur des fragments d'hypocotyles par coculture avec une souche desarmee d'a. Tumefaciens. Aucune plante transformee n'a ete obtenue par cette approche. La deuxieme methode consistait a co-inoculer des vitroplants avec un melange d'une souche sauvage d'a. Tumefaciens, inductrice de tumeurs, et d'une souche desarmee. Les plantes transformees ont ete identifiees au moyen du test histochimique gus. Les transformants primaires obtenus ont fait l'objet d'une analyse moleculaire. L'integration de l'adn-t dans l'adn vegetal a d'abord ete verifiee chez toutes les plantes analysees. L'etude de la transcription des transgenes a ensuite ete abordee. Si l'arnm a ete detecte chez toutes les plantes analysees, la quantite d'arnm presente dans les cellules vegetales semblait tres faible chez la plupart des plantes. Concernant les plantes transformees avec le gene iv, l'expression de la proteine de capside n'a jamais pu etre mise en evidence