Abstract FR:

L'alpha-1 antiprotease humaine, inhibiteur de la famille des serpines a ete l'objet de nos etudes. Ce substrat suicide des proteases a serine subit un rearrangement structural important apres proteolyse de la liaison peptidique reactive met 358-ser 359, le rendant inactif. En utilisant les signaux intrinseques de la proteine (principalement l'emission de fluorescence des residus aromatiques et l'ellipticite) nous avons cherche a preciser l'ampleur des rearrangements structuraux induits par la proteolyse de la boucle reactive et l'insertion de sa partie n-terminale dans le feuillet beta a. Les resultats obtenus indiquent que, dans la conformation de l'inhibiteur proteolyse, l'etendue des surfaces hydrophobes accessibles a l'acide 8-anilino-naphtalene sulfonique est plus faible que celle de l'inhibiteur natif. L'environnement des residus aromatiques est aussi modifie: ce rearrangement se reflete non seulement par la modification conformationnelle des segments proches du feuillet beta a mais aussi de la partie proche du nouveau c-terminal, de l'helice f et du feuillet beta b. Ces modifications structurales ont ete mises en evidence par les modifications des pk#a#p#p d'ionisation des tyrosines ainsi que par la modification des transitions de denaturation-renaturation caracterisant chacune des deux formes de l'inhibiteur. L'etude du repliement de l'inhibiteur a ph 8,5 et a ph 10,6 nous a permis de discuter le role de la tyr 244 dans les modifications de l'environnement du trp 194, ainsi que la participation possible de la tyr 187 dans la restructuration du feuillet beta a. La conformation metastable de la structure native de l'inhibiteur maintenue par la boucle reactive specifique ainsi que le processus de reorganisation du feuillet beta a contribuant a la stabilisation de la proteine apres proteolyse, constituent un modele d'etude particulierement interessant pour la comprehension du role de cette etape ultime du repliement de l'alpha-1 antiprotease et plus generalement des mecanismes de regulation caracteristiques des inhibiteurs plasmatiques des proteases