Abstract FR:

Plus de 10 000 sacs embryonnaires et des protoplastes provenant de l'ovule entier ont ete isoles a partir d'ovules de petunia hybrida l. Les arn totaux et messagers extraits de ce materiel ont ete utilises lors de la construction de deux banques d'adn complementaires d'ovules et de sacs embryonnaires apres amplification prealable de l'adnc par la methode de pcr. Parallelement a la construction des banques, une approche de rt-pcr (reverse transcriptase pcr) a permis d'identifier une famille de genes exprimes dans l'ovule de petunia. Les produits de ces genes sont apparentes a la proteine serine/threonine kinase gsk-3 (regulateur du facteur transcriptionnel c-jun) des mammiferes, shaggy/zeste-white 3 (impliquee dans le developpement embryonnaire de drosophila melanogaster) ainsi que mds1 chez saccharomyces cerevisiae. Par ailleurs, une approche similaire a conduit a l'identification d'une autre famille de genes codant des homologues vegetaux de la proteine serine/threonine kinase map/erk, proteine impliquee dans le cycle cellulaire et dans une multitude de processus du developpement chez les animaux. Par la suite, les produits de pcr ont ete utilises comme sondes afin d'isoler a partir de la banque d'adnc d'ovules trois adnc pleine longueur, psk4, psk6 ('petunia shaggy-related protein kinase') et pmek1 ('petunia map/erk-related protein kinase'). L'etude de l'expression tissu- et stade-specifique des trois genes a revele plusieurs caracteristiques interessantes: psk4 et pmek1 sont exprimes tous deux a la fois dans les organes vegetatifs et reproducteurs femelles, mais jamais dans les antheres. Le messager de psk6 s'accumule de maniere transitoire dans les organes reproducteurs males dans le tapetum au stade meiose des microspores puis plus tardivement dans le grain de pollen nature. Le gene psk6 est egalement exprime dans les ovules tout au long de la gametogenese mais le transcrit est peu ou pas detecte dans les feuilles, tiges et racines