Abstract FR:

In vivo, de nombreuses etudes ont montre, dans les adipocytes, que l'insuline est un facteur regulateur majeur de l'expression de glut4 contrairement a glut1 dont l'expression est peu affectee par l'hormone. Cependant, pour mettre en evidence un effet direct de l'insuline sur l'expression de glut4, l'utilisation d'adipocytes en culture est indispensable. A cette fin, nous avons developpe un systeme de culture primaire d'adipocytes isoles de rat. Durant la culture, on a observe une chute d'expression de glut4 concomitante a une augmentation de l'expression de glut1. De plus, cette augmentation de glut1 est potentialisee par l'insuline, alors que l'hormone n'a aucun effet sur l'expression de glut4. Cette discordance entre les observations in vivo et in vitro suggere que d'autre(s) facteur(s) que l'insuline seraient impliques in vivo. Nous avons envisage les glucocorticoides comme candidats pouvant interagir avec l'insuline. L'addition de dexamethasone, glucocorticoide de synthese, au milieu de culture n'entraine pas de modifications d'expression de glut4 mais provoque une chute d'expression de glut1. Cependant, quand l'insuline et la dexamethasone sont associees, on constate: 1) une action synergique des 2 hormones sur l'expression de glut4 (+550% pour les arnm et +164% pour la proteine) 2) un effet antagoniste des 2 hormones sur l'expression de glut1 dont le niveau est identique a celui des cellules cultivees sans hormones. Les etudes du mecanisme moleculaire d'action des deux hormones sur l'expression du gene de glut4 ont permis de reveler, par analyse en run-on, qu'elles exercaient une action sur la transcription du gene (x3), mais etaient sans effet sur la stabilite des arnm. Des transfections transitoires d'adipocytes de rat avec une partie de la region 5' flanquante du gene de glut4 (-2212+164) liee a la luciferase ont montre que l'activite du promoteur de glut4 etait inchangee en presence d'insuline seule, augmentee de 50% par la dexamethasone et multipliee par 3 en presence des 2 hormones. Nos resultats demontrent une synergie entre l'insuline et la dexamethasone sur l'expression de glut4. L'action des hormones s'exerce au niveau transcriptionnel et passe par une activation du promoteur