thesis

Identificato de proteines regulees par le calcium chez escherichia coli

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Paris 11

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Le ca#2#+ joue un role important a la fois chez les eucaryotes superieures (whitaker and patel, 1990) et inferieurs, y compris chez la levure (lida et al. , 1990), dans la regulation des evenements cellulaires. Nous avions propose que le ca#2#+ pourrait jouer un tel role chez la bacterie (norris et al. , 1988). Ainsi un flux de ca#2#+ aurait lieu, une fois par cycle, a une masse specifique recemment nous avons examine l'effet de l'egta ou de bapta sur la synthese de proteines d'e. Coli et en particulier, l'effet de ces traitements sur la synthese de proteines thermostables et acides, caracteristiques de proteines fixant le calcium, telles que la calmoduline eucaryote. Ces etudes ont porte sur un mutant resistant au verapamyl, le mutant vera1, delete de trois genes, hns, galu et rssb. Ce mutant est a la fois hypersensible a l'egta et au ca#2#+ et le traitement par l'egta ou le bapta s'accompagne de changements dramatiques dans la synthese de plusieurs proteines thermostables. Le microsequencage a partir des gels 2-d a permis l'identification de plusieurs de ces proteines. Nous avons montre que les proteines dont l'expression est induite par l'egta peuvent etre classees au moins en deux groupes, certaines repondant a un choc osmotique et d'autres repondant apparemment a une depletion de la concentration intracellulaire en ca#2#+. La synthese de ce dernier groupe de proteines, en particulier de p12, p19 et p34, est egalement induite a de faibles concentrations d'egta ou de bapta et par l'accumulation intracellulaire d'une proteine fixant le calcium, la calerythrine. Deux de ces proteines, la p19 et la p34 sont cytoplasmiques et sont reconnues par les anticorps anti-calerythrine et anti-calmoduline eucaryote. De plus, la p19 montre une difference de mobilite sur gel sds-page en presence ou non de ca#2#+, caracteristique de proteines possedant des poignees ef comme la calmoduline