Optimisation de la micropropagation de deux especes legumieres (petroselinum crispum mill. Et brassica oleracea l. Var. Botrytis) en vue de l'obtention de vitroplants conformes pour un programme de selection
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Plusieurs voies de micropropagation du persil (embryogenese somatique, caulogenese et bourgeonnement axillaire), a partir d'explants de plantes adultes, ont ete mises au point et comparees. La propagation par bourgeonnement axillaire, realisee pour la premiere fois chez une apiacee, est la seule methode permettant d'obtenir des vitroplants apparemment conformes. Le bourgeonnement axillaire est realise sur milieu ms additionne de 5 m de ba et de 0,5 m d'ana, plusieurs subcultures sont possibles sur ce milieu. L'enracinement est induit par une culture de deux semaines en presence 2,5 m d'ana, l'emergence des racines intervient au cours de l'acclimatation. Ce protocole est le premier qui soit applicable a un programme de selection du persil. Une methode efficace de propagation, limitee a une seule phase de culture in vitro, a partir d'explants de preinflorescence de chou-fleur d'hiver et de printemps, est proposee. Chez les cultivars d'ete et d'automne sensibles a l'hyperhydricite, des conditions de culture permettant de reduire l'apport des regulateurs de croissance, ont ete recherchees. L'existence d'une interaction entre les regulateurs de croissance et la composition du milieu a ete demontree. Le protocole de propagation mis au point est constitue d'une induction par un pretraitement osmotique de 24 h dans une solution de saccharose a -2 mpa puis d'une culture sur un milieu depourvu de regulateur de croissance. Les pousses produites par cette voie ne presentent aucune manifestation d'un etat hyperhydrique et subissent l'acclimatation sans dommages. L'ensemble de nos resultats revele l'intervention de l'ethylene et des cytokinines lors de l'induction osmotique de la multiplication vegetative a partir de preinflorescence de chou-fleur. Le choc osmotique provoque en effet une importante augmentation des teneurs en cytokinines endogenes, notamment en zeatine et en zeatine riboside, composes a forte activite cytokinique. Cette methode originale de propagation du chou-fleur presente toutes les caracteristiques indispensables pour une integration a un programme de selection : une bonne qualite physiologique des pousses obtenues ; la conformite des vitroplants ; une mise en oeuvre particulierement aisee et peu couteuse.